小鼠破骨細胞進行培養(yǎng)過程中的威脅就是細胞污染，凡是混入細胞培養(yǎng)環(huán)境中，對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細胞一旦遭到污染，所有的實驗結(jié)果都會變得毫無意義。因此，及時檢測并鑒定出所培養(yǎng)的細胞是否被污染至關(guān)重要。
細胞培養(yǎng)實驗室要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室要相對封閉，潔凈無塵，設(shè)有緩沖間。
對實驗室進行定期清掃、紫外消毒是避免細胞培養(yǎng)過程中由于實驗室環(huán)境引起細胞污染的主要措施，此外，實驗室內(nèi)不要放太多雜物，保持實驗室干燥，有利于降低因?qū)嶒炇覘l件引起的細胞污染率。
小鼠破骨細胞培養(yǎng)過程中實驗人員是否操作規(guī)范，是否嚴格遵守無菌工作流程，是細胞污染的一個主要因素。操作人員進培養(yǎng)室前，必須先洗手，在緩沖間換穿專用實驗服和拖鞋，嚴禁在實驗進行時頻繁出入培養(yǎng)室。實驗后應(yīng)將實驗產(chǎn)生的廢物和廢液及時清理出培養(yǎng)室，并清潔無菌工作臺。
細菌和真菌污染很容易被檢測，因為受到細菌、真菌污染的細胞，培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基會出現(xiàn)肉眼可見的明顯特征。細菌污染會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁、顏色改變以及pH值急劇變化，受污染的貼壁細胞在幾天內(nèi)會逐漸脫壁死亡。真菌污染后的細胞生長速度變慢，培養(yǎng)基中會漂浮白色、淺黃色或黑色的小點。
因此，通過觀察培養(yǎng)基的顏色、漂浮物、pH值或在顯微鏡下觀察小鼠破骨細胞及其生長狀態(tài)，從而能初步判斷該細胞是否受細菌、真菌污染。
也可以使用培養(yǎng)檢測法：將細胞培養(yǎng)物在各類培養(yǎng)基中適溫培養(yǎng)若干天后，觀察是否有細菌或真菌生長。
更新時間：2022-10-13
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